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      昆蟲細胞蛋白表達

      昆蟲細胞蛋白表達

      強耀生物科技有限公司已成功構建完整的各種蛋白表達技術平臺:包括原核蛋白表達與純化、酵母蛋白表達與純化、昆蟲細胞蛋白表達與純化、哺乳動物細胞蛋白表達與純化。根據客戶的需求,我們提供從基因合成,載體構建,基因表達,蛋白純化、檢測等一站式服務。為了保證蛋白純化的質量,強耀生物建立了嚴格的產品質控體系及一整套完善的客戶服務流程、保密制度以確保為客戶提供優質的產品及成熟的服務。 我們的蛋白質團隊在優化基因密碼子、表達載體的設計和構建、融合對象和標簽的選取、特定蛋白純化系統的選擇、蛋白生產工藝的優化等方面,擁有較多的經驗??梢詽M足客戶個性化的需求。

      昆蟲細胞蛋白表達與純化

      昆蟲細胞表達系統是應用較多的真核表達系統,它可以在昆蟲細胞中表達多種外源基因,包括真菌,植物,細菌,病毒的基因。桿狀病毒是一類以昆蟲細胞為天然宿主的雙鏈DNA病毒,具有高度的種屬特異性,不感染脊椎動物,對人、畜無害。目前研究較多的是苜蓿銀紋夜蛾核多角體 (AcNPV) ,其宿主是草地貪夜蛾。而sf9細胞,正是桿狀病毒表達系統的宿主細胞之一。sf9細胞屬于半貼壁型細胞系,可以進行懸浮培養,也可以進行貼壁培養,在應用于蛋白的表達與制備純化中,有著許多的優點。

      1、與其他真核表達系統相比,外源基因表達水平高,特別是細胞內蛋白。多數情況下,表達的重組蛋白可溶,折疊正確有翻譯后修飾(如糖基化等),有生物學活性,容易分離純化;
      2、昆蟲細胞懸浮生長,容易放大培養,有利于大規模表達重組蛋白;
      3、易于表達異源多聚體蛋白,可通過多種重組病毒同時感染昆蟲細胞或用含有多個表達框的一種病毒感染昆蟲細胞來實現;
      4、安全性。昆蟲桿狀病毒不感染脊椎動物。

      強耀生物科技有限公司提供桿狀病毒表達載體構建、表達檢測以及從大容量細胞培養表達和蛋白純化等一站式蛋白表達技術服務。

      1、克隆目標蛋白編碼序列到昆蟲桿狀病毒轉移載體上;
      2、制備重組質粒;
      3、轉染昆蟲細胞,制備病毒;
      4、病毒滴度測定;
      5、重組蛋白表達驗證和條件優化;
      6、小規模蛋白表達和純化(500 ml培養物);
      7、大規模蛋白表達和純化(可選,適合于生物醫藥研究企業)。
      相關技術服務:
      昆蟲桿狀病毒制備技術服務
      蛋白表達優化技術服務
      1、由客戶提供5-10ml重組桿狀病毒;
      2、感染昆蟲細胞獲得高滴度病毒;
      3、表達條件優化。
      優化因素包括:
      不同的昆蟲細胞系;
      不同的表達時間;
      不同的感染復數(MOI);
      病毒滴度測定服務;
      空斑實驗測定滴度。
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